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研究室ついでに先日ニトロプラスさんから届いたファントムのサントラCDを聴く。初っ端の「phantom」を聴くと眠気も吹っ飛ぶ、や、マジで。
ファントムと言えば、
ここの人気投票にて、2000年パソゲー内で2位の神語に1500票差をつけてぶっちぎりのトップなのは驚き。組織票とかなんとかそれくさいが、そういう所もあるんだと思うことしきり。ちなみに別の投票(妹にしたいキャラ)(嫁さんにしたいキャラ)なんぞでファントムの登場キャラのうちランク入りしてるのがリズィとか志賀透だとかの脇キャラばかりって所がなんとなく信憑性あって(滅笑)。や、私もリズィは大好きだけど。
でも今年もコンプあたりじゃ鍵が一番かなぁ。鍵野郎としてはそれはちょっとイタいんだけど…
一章でアインが使っていた長モノは、反動とか考えるとアインでは物理的に使えないんじゃないかトカ言っていたのは元帥だった。元帥曰く、この銃の選択は狙ったかのよーなミーハーぶりらしい。そーなのかしら△×△×番長?
上の投票じゃないけど、このゲームは「ビ・ヨンド」以来久々に勧めまくりたくなったパソゲーだ。
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昨日から続いた実験の手順を覚え書き
1. 2.5mLのシリンジ(注射器)を用意し、中にジメチルジクロロシアンで処理(ガラス自体にDNAが吸着するのを防ぐため)したガラスウールを詰める。一応ピストンでウールは底部に詰める。
2. 次いで1mLの粉末PVPP(ぽりびにるなんとか、腐植酸を吸着する能力がある)を入れ、上からTEバッファーを流し込む。次いでシリンジを10mL遠沈管に入れて遠心機にかけ、下からバッファー液体が出るまで回す。つまりPVPPが濡れればよいわけで。某アンチョコには2000gで充分だとあったが、ガラスウールを詰め過ぎたためか5000rpmでもなかなか液体が下まで落ちず、一度思いっきり数値を上げてガラスウールがすっぽ抜けたという失敗あり(苦笑)。
3. 下の落ちてきたバッファーは捨てる。
4. あらかじめエタノール沈殿にて保存してあった粗DNAを、まず遠心機にかけて浮遊物を落とした後エタノールを自然乾燥も併せてあらかじめとばす。TEバッファーを1mL入れ、68度のオーブンの中に数分間入れ、ヴォルテックスも併用して沈殿物を溶かす。
5. 4.で得た希釈液をシリンジの上部に入れ、遠心機にかける。
6. 下に落ちた希釈液をエッペンチューブに入れ、-20度で冷凍保存
で、結果。
6. まで来たサンプルはかなり透明度高し。よっしゃよっしゃ。しかし二つあるサンプルとそのセットのうち、一方が腐植酸が下まで抜けてしまったらしい。遠心機の問題もあるが、改善の余地あり。
まずかった点
その1. シリンジから滴下する試料を受ける場所の問題。空気とのコンタミをできるだけ避けなくてはならない。
→対応策:中に小さなエッペンチューブを入れ、10mL遠沈管はシリンジの口がエッペンの中に入るように短くする必要がある。
その2. 回転数を上げてもなかなかサンプル、バッファーが落ちない。
→原因その1.:ガラスウールの詰め過ぎ。それによりPVPPが水分を吸ったまま遠心により密状態になり、ますます希釈液が落ちにくくなる。
→対応策:ガラスウールの詰め方を工夫する。厚めに、それもゆるやかに詰める。
→原因その2.:TEバッファーに希釈した粗DNAが完全に溶けきっていなかった
→対応策:方法4.で溶けないDNAは何らかの薬品を使わなければ溶けようがないので、仕方がないから捨てる方向で行く(そもそも、乾燥により腐植酸がポリマー化した可能性が高い)。TEバッファーに溶かした後、一度遠心機にかけて沈殿物と上清に分け、上清だけをシリンジに注入する。
→原因その3.:PVPP自体の粒子が細かいので、強い遠心にかける事自体が密状態に繋がる可能性がある。それでなくても液化することによる可能性もある。
→対応策:遠心を弱くするか、もしくはあらかじめ別場所でDWorTEバッファー処理したPVPPをカラムに詰める。あるいはバッチ法(10mLくらいの遠沈管にTE処理したバッファーとPVPPを放り込み、撹拌して遠心機にかけ、上澄を取って来る方法。前述な方法と比較して精度と収集率に劣るが、簡便という利点あり)に替える。
まだ問題有り…らしい、な。しかしPVPPが使える事はよっくわかった!!
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まじ?…改蔵も嘆いてますが日本人の月軽視傾向はまったく嘆かわしいですな。…とは言っても確かに小学校の理科の時間に「月には空気も水もない」とは習った覚えがなさそう、どっちかってーと学習まんがトカ学研雑誌のお世話になったような気が。
でももしかすると「だって月にはムーンレイスがあるじゃないですか」「アナハイムエレクトロニクスが」「螺旋城が」なんて思っているのかも。