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毎日書くから、日記って言うんですよ


日記鯖システム管理者からのお知らせ

  • HTTPSに対応し、http://ds.sen-nin-do.net と https://ds.sen-nin-do.net のどちらでも日記鯖にアクセスできるようになりました。 なお、当面はHTTPとHTTPSのどちらも利用可能としますが、将来的には http://ds.sen-nin-do.net へのアクセスは https://ds.sen-nin-do.net へ転送する予定です。
  • 都合により日記鯖のURLが http://ds.wa-mo.to/ から http://ds.sen-nin-do.net/ に変更となりました。 突然で申し訳ありませんが、よろしくお願いいたします。(2019/01/27)
  • 日記鯖の仕様変更、不具合対応等については、こちらの記事もご覧ください。

ますたぁの日記です。日々起こった筈の情報を言葉に変換しています。

日々(主に休日)撮った写真とかはこっちです。

カラオケに行こう

◆ 雪の後で非常に道路の状態が悪い。昨日の夜ほどじゃないが。

◆ ……元気だなぁ貴様ら(笑)。行ったのはHYPERJOY。先週セガカラに行ったので今週はこっち、とのこと。……多分、ほぼ一年ぶりの歌である。

いつものことながらHYPERJOYの品揃えの多さには恐れ入る。あ、筋肉少女帯の歌がまた追加されてる…けど、どーして「for elise」以前からばかり取ってくるのだろう…小さな恋のメロディは歌ったけど。一番の驚きは坂本真綾さんの「しっぽのうた」。ゲームより歌の方が一人歩きして有名…なんだろうな、やっぱり。

リクエストに「ポピーザぱフォーマー」のオープニングを希望と書く。…多分無理だろうけど。

◆ GIGAに行くと、見慣れぬ若い(それで、どこか疲れた)顔が多い。ああそうか、今日はセンター試験の日だ。ストIIIをやっていたのでひょっこりと入る。8連勝までして、ケンとゴウキの波状攻撃に疲労負け。勝つのはつらいんだぞー、最後のほう、明らかにレバー入力ミスしていたが。


◆ とりあえずたまっていた土曜日からのビデオを見る。

・トライゼノン……なんか、嵐の前の静けさという回、らしい。三倍早送りで見ていたからよくわからんが。ところでこの展開って、「ゲキ・ガンガー」でもこんなのあったような?

・ゾイド/0……人の話を聴かない主人公というのは、ムカツク奴と爽快な奴の2タイプあるが、ビットは今の所トライゼノンの章と並んで後者。両者にはけっこう隔たりがありそうだが。もちろんキャラだけの問題じゃないだろうけど。

・タイムレンジャー……子供はついていけるのかこのお話に!? なんだか完全にドラマだぞこりゃ!

・はなまる王……いつ見ても面白いなぁこれ(爆)。

真・ゲッターロボ入手!

◆ 方法はどこぞの掲示板にもありましたが、とりあえず早乙女研究所を最初に回り、アインストシリーズの敵を研究所に進入させる事。かなりボーリョク的強さです。とくにストナーサンシャインとか。ヘーキで20000のダメージを与えます。サギやね。

・ゴッドボイスは手に入らず。ま、どーせライディーンなんて使わないし。

・で、やっとこさシーン3が終わり、戦力も増強されてきた。しかしいつ何時誰が抜けるのか気の許せない状況が続いている。

・とりあえず、第一部から第三部まで完全に続きモノであることを前提としているため、第三部のしょっぱなでいきなりディラド星が粉砕されたり、出てきたばかりの名前のある敵キャラがバタバタ死んでいくってシーンがバリバリ続くもんで。当然のよーに第二部までで広げまくったフロシキを収拾するのに大変そうなのはわかるけど。

・さっきの話の続きだけど、あくまでメインは謎の敵、アインストシリーズであるため、今回はいつも敵方の中核を占めていたジオン(ネオジオン)の影の薄いこと。というかここまで来てまだネオジオンは一度も登場していない。その辺かなり不満。

・あと、やっぱり6ターンクリアが事実上不可能な面が多いのは勘弁かなぁ(笑)。6ターン敵フェイズに増援とか。

まだやってるSRWCOMPACT2

◆ 現在よーやくSCENE5です。とりあえず言わせて下さい。

・祝! エクセレン復帰!!

いや、長かった。それに伴い謎の敵アインストシリーズの正体も段々とわかってきたし。しかしヴァイスリッターはそのまんまパワーアップ前に戻ってしまうのがちょっと残念。復帰した時はレベルは37、既に奇跡だって使えます、ああオソロシヤ。

・前回の続きになるところだけど、やはり第三部の主軸はアインストシリーズと主人公達の関係、ということになりそう。その分他の敵がかなりナイガシロになっているのがいただけないと言えばそうなのだが。

・難易度はやっぱりかなり高い。しかしその分精神コマンドをかなり使いまくれるようになったので融通は利く。とくに再動を計4回も使えるのはかなりムチャが効く。後半になって6ターンクリアがそう難しくなくなってきた。

・宇宙に打ち上げられる直前になってズワウスをもらっても扱いに困るだけだ(笑)。

◆ これではKOH君がまるで年寄りみたいではないか、まだ彼は10代だぞ(笑)。

◆ 結局今日は歯医者だのPCRだのに追われ、帰る頃にはくたくたになって疲れ果てて眠っていた。はぁぁぁぁ〜(こてん)。

◆ とりあえず昨日の続きで、ラフレシアをぶちのめしに行く。しかしあまりに敵の居場所が散漫で、8ターンもかかってしまう。よくある話なんだけど。しかしここまで来るターン数はなにかシナリオに引っ掛るのかしら? 例えばラストの隠しシナリオとかに。

・しかしそろそろ敵の武器のダメージがきつくなってきた。つまりはモビルスーツ隊の出番である。鉄壁でもかければ問題ないのだが。

・ガトーとの最終対決。クワトロで説得はできたのだが、コウでの説得方法がわからず。どうも初めてなので精神コマンドを温存しがち。7ターンかかってしまった。しかしここまで来るとあんまり集中力は必要なくなってくるんだけどね。

◆ 別に即答ってわけじゃありませんよ、金がないのがわかっていたからです。でも買っても多分誰もやらないんだろうなぁ…

◆ 家に帰って電童を見る。三人が大喧嘩して口を利かない(つってもスケブに言葉を書くのはどうかと思うが)、で、データウエポン達が一肌脱ぐと。AパートとBパートの分け方が絶妙で、かなり面白かった。って良く見れば小林靖子さんではないですか脚本が。戦闘シーンが割を食っていたよーに見えたのもそのせいかしら? 私は三人が大喧嘩して戦闘中まで喧嘩していて、という展開かと思っていたのだが、ってこれはエルドランでよくやったなぁ(笑)。

・あ、あと、セルファイターの攻撃でびくともしなかった機獣がヴェガのバイクの攻撃でひるむのは、なんか不公平。そこまで強いのかあのバイク+ヴェガさんは(笑)。スパロボで電童が出たら、Sサイズユニットあたりで出そうだな。しかも東方不敗あたりと一緒に。

たまには実験の覚え書きでも(覚え書き有り)

◆ 以前からのサンプルからのDNAの抽出、精製法。この前の改定バージョン。メモメモ。


0.あらかじめ使う器材は、オートクレーブにかけておく。1サンプルにつき、15mL遠沈管×5(手順1.で×1、5.で×3、7〜8のカラム作りに×1)、PVPPカラム約2mL、ガラスビーズ2mL(←サンプルと等量)、エッペンチューブも必要あれば。サンプルは冷凍乾燥機にかけて水分を飛ばした後、厚めのポリビニル袋に入れて指か筒状の硬いもので押し潰しておく。細かいとかさが少なくて済む。

1.サンプルをオートクレーブにかけた遠沈管内に入れる。15mL遠沈管なら薬さじの大さじ一杯、エッペンチューブなら小さじで一杯くらい。

2.カビ用のバッファーを、15mL遠沈管なら4〜5mL、エッペンなら0.5〜0.6mL程度、還元剤メルカプトエタノールを0.1%(0.06mL)入れる。バッファーはサンプルが全て浸かる程度あればよいが、多過ぎるとフェノールが入れられなかったり、DNA濃度が小さい時に二度手間になる。

3.同量のあらかじめオートクレーブにかけてあったガラスビーズを入れ、ヴォルテックスその他諸々で浸透させる。サンプルが全て粉々になれば良いのだが、あまりここで時間をかけすぎるとバッファーやサンプル内の核酸分解酵素がDNAを分解してしまう。エッペンチューブなら5分程度で良いと思われる。ここはさっさとやること。

4.遠心機にかけ、30分、3500rpm、20℃で粗物、ビーズを落とす。

5.フェノール抽出を行う

5-1.フェノールをバッファーと同量入れ、よく攪拌する。次いでよく攪拌させた上で20分、6000rpm、20℃で回し、フェノール層(下)と水層(上)に分けた上で上澄だけを持ってくる。これを、上層と下層の間にできるタンパク質の層がなくなるまで繰り返す。

5-2.フェノール・クロロホルム・イソアミルアルコールを24:24:1の割合でバッファーと同量分加え、よく攪拌させた上で20分、6000rpm、20℃で回し、フェノール層(下)と水層(上)に分けた上で上澄だけを持ってくる。

5-3.クロロホルム・イソアミルアルコールを24:1の割合でバッファーと同量加え、よく攪拌させた上で20分、6000rpm、20℃で回し、クロロホルム層(下)と水層(上)に分けた上で上澄だけを持ってくる。

<クロロホルム及びフェノールは水に溶けにくい(フェノールは比較的溶けるが)。5-3で残っているかもしれないフェノールを除去している>

6.上記の上澄は、普通ならば透明に近くなっているが、多分それはない。ここまでで大部分のタンパク質は変性、除去されていると思われる。

7.上澄液の量にもよるが、PVPPカラムに入れられるほどならば(2mL程度まで、1mLが良い)そのまんまカラムにかける。多ければ一度エタノールによる沈殿、濃縮を行う(→7-1)か、カラムを複数用意する。

7-1.上澄液にサンプル量の20%量の10M酢安、およびサンプル+酢安量の60%量のプロパノールを入れ、今度は0℃、6000rpm、20分遠心。

7-2.70%エタノールを適量加えて攪拌し、フェノールを取り除いた上でDNAを遠心機(回転数は遠沈管サイズにより異なる、0℃で30分程度)により下に落とす。

7-3.適量のエタノールを捨て、やや乾燥させた後に(エタノールの匂いが少々残る程度、あんまり乾燥させるとフェノールがポリマー化してDNAが使えなくなる)TEバッファーを適量(カラムに入るくらい)入れて攪拌し、DNAを溶かす。この時、ヴォルテックスにゆるめにかけ、粗DNA溶液を68度の湯で温め、DNAが溶けきるまで溶かした後、遠心に一度かけて上澄だけをカラムに入れるようにする(カラム詰まりを防ぐため)。

8.オートクレーブにかけた脱脂綿、(水を含んだ)PVPP、シリンジを用意し、15mL遠沈管内に蓋を取ったエッペンチューブをセット、カラムを作る。この時、シリンジの口とエッペンの口が重なり合い、遠沈管内の空気によるコンタミを防ぐ。

9.カラムにサンプルを入れ、遠心機にかける。遠沈管内のエッペンチューブはそのまま中身を別のチューブに移し、保存する。

9'.シリンジがない場合、PVPPを直接サンプル内に入れ(どの程度必要かはまだわからない。ただ、PVPPは水分を含んでゲル状になる(遠心機でも分離しない)ため、多過ぎるとDNAを取り出せなくなってしまう。その際は滅菌水等を加えて量を増やす)、ヴォルテックスにかけてよく浸透させる。後に遠心機にかけ、上澄だけを取り出す。

10.PVPPをかけたサンプルは酢安、プロパノールを20%、60%入れてその段階で冷凍保存。冷凍保存の意味は、DNAの分解を抑える意味もあるが、最も重要なのは溶液の温度を下げる事によりDNAを析出しやすくすることにある。


◆ 研究室の人間一人を、ファントムにハメる事に成功する(ニヤリ)。クラウディアがかなりお気に入りらしい。

◆ 昨日ルネテラスで言われた事だが、最近私はコンシューマーで冒険買い(地雷アサリとも言う)をせず、その舞台をエロゲーにしていると。……たしかにそうかも。多分現在のコンシューマはPS2とドキャというのが、最も大きな原因ではないかと。ドキャはともかく、PS2は設定や見た目で買わせる力が明らかに小さくて。結局「××××の続編が出たら」トカって事になってしまう。PS2の開発費は新規参入パーティがひょこひょこと入ってできるようなものではないと言われているのだが。

・そーいやドキャの生産がとうとう中止になったらしい。これからギャルゲーに頼る事になるのかぁ、あ、その前にLUNARね(爆)。

・それと、プリンセスプレイは確かに悪い事をした。反省。

◆ 家に帰り、暫く中断していた「D その景色の向こう側」への独り言を書きにかかる。うーむ、このゲームNF前にやっていればにょ先生をもうちっといじめる事が出来たんだけどな、感謝。

半月ぶりの更新ですが

◆ 独り言に「D その景色の向こう側」をUP。いやぁ、難産だった。

◆ のっそりと昼頃起きたら、郵便局からの不在届が、とーぜん送り主はニトロプラスさんより。私は家にいたとゆーのに、これでプレイが一日遅れそう。

◆ 日が変わる直前辺りまで実験室に縛られ、週末はいつものよーににょ邸で飲んで、寝る。ぐー。

・そーいえば、秋津先生に頼んどいた「百舌鳥のニエ」がやってきた。おおお。

・ワインだけだったので、あっという間に酒がなくなって、そのぶん撤退も早かった。寒いし、明日は結構早いし。

散在、じゃない、散財する土曜日。

◆ で、今日も実験なのだがその合間を縫って郵便局に行き、ヴェドゴニアを受け取りに行く。8100円ナリ。次いで本屋にて「パタリロ!」71巻と「僕にお月様を見せないで」を受け取る。いじょ。ゲームができるのは夜半遅くになりそうだし、それ以上に片付けるゲームがいくつかあったよーな。

◆ 実験で帰れない。いつものことだけど。うーん飲みたいぞ週末くらいは。せっかく今木さんが京都に来ているというのに。

◆ 失敗に次ぐ失敗でトキハナタれると、れっどまそ邸に行ってGGXの対戦をやる。ファウストはいかに単体では弱いか、ちびファウストを出していかに戦略をとるかが問題となるらしい。なんとか勝てるんじゃないかなって所まで来たが、あとはフォルキャンか。

◆ その足で一度家に帰り、今木さんが来ているというぽて邸に寄る。試飲会でもらった(?)らしい生酒は、炭酸っぽくてびっくり。いや、あそこまで生な酒は初めてなもんで。解説ありがとうPantser氏。

・飲んだはいいが、見せるため持ってきた十億翼弐をぽて氏とフォークさんが返してくれない。ひどいや。

・5時前に帰り、とっとと眠るよハム太郎。

寝過ごした!

◆ …いつものことだが。学校へごー。

◆ で、金曜日からずっと続けている実験だが、ゲルがどーもうまく固まってくれない。おかげで今まで失敗続きのまま、休日返上で頑張っているのだが…そろそろ集中力の切れ時かも、まずいな。

で、そろそろ9時なんだけどまだ帰れそうにないや(笑)。失敗続きで覚え書きも書けない、いや、失敗経験談も書けばいいんだけどよ。

◆ 実験の合間を縫ってCOMPACT2。いいかげんクリアしてRatty氏に渡さねば。とりあえずこの前から順当にクリアして、

・ハマーン様との決着。FのよーにキュベレイのHPが4万以上なんてことはなかったが、確かに強いなハマーン様。援軍到着が遅れたこともあって8ターンかかる。それにしてもこのレベルになると複数人パイロットが乗っているスーパーロボット系は「覚醒」が欲しくなるなぁ(笑)。結局持っていたのはゲッターチームだけだった。

・キャンベル星人との決着。右下のほうが不自然に開いていたのでこっちに増援かと思ってたら、突然ぐるりと囲むように。しかも左上以外は殆ど雑魚(どのくらい雑魚かってーと、アルトアイゼンでは受けるダメージが10前後)。5ターン目で出てきた時には泣かされたが、再動と覚醒の使いまくりでなんとか6ターンクリア。シャザーラの再動には本当にお世話になります(笑)。

・で、現在マーズ・アタック(ゴッドマーズにこんな技あったような)。シローを出している余裕などないとゆーのに(笑)、それでもGP-02欲しさに出撃。 なんどかやり直してようやくクリア。とーぜんイルボラとシャルムは説得できず、どっちも火星の藻屑。この面は敵がしゃこしゃこと自軍に向かってきてくれるので5ターンでクリアが可能。シローを出さなければならない分、パンチ力のあるユニットが減ってちょっときつかったが、まぁ問題なし。それにしてもシャザーラの再動と小介&ロミナ姫の脱力にはお世話になるのう。

・試しに手に入れたGP-02を使ってみたら…ををを、攻撃範囲が第4次の頃並にでかくなっているではないかっ!! 運動性に問題があるが(つーかかなりある)、もしかして使えるのでは!?

朝早くに

◆ と言っても10時前だが、ぽて氏がやってきて、にょ氏のビデオを大量に置いていく。なんでもいなかったらしい。了解して預かっておく。

◆ そのまま危うく布団に入りかけたが、今日も午前中からゲル作りだったので学校へ急ぐ。

・で、ようやっと成功していた。わかる人だけわかってくれれば良いのだが、アクリルアミドでゲル板を作る場合、空気に触れない所からアクリルアミドは固まっていくため上のほうが中々固まってくれなかったのだ。それであれこれと試行錯誤していたのが金曜日から昨日まで。いや、長かった!

・もちろんここからがしょーねんばで、電気泳動をセットしてこの前PCRで増やしたDNAを流さねばなるまい。……今日も洗濯は絶対に無理。風呂もかなり難しいなぁ…

◆ だって、先週本人の口から「来週は有給をとって映画を見る」と言っていたではないの。ついでに言うと、見せた時点で中身を見せるのと同義語ではないだろうか、自分の行為を肯定するわけじゃないが。早いところファントムを、もとい、アインエンドを見るのだ。あ、その前にLienもな。

◆ 9時前に一度ルネへ寄り、その足でT中に「百舌鳥の贄」を渡し、ギガウイング2をやったりGGXの対戦をしたり。△×△×番長が「ヴェドゴニア」のマニュアルを見て大笑いしていた。

・ところでT中先生、先生のHPアドレスはいずこ?

◆ 11時すぎに解放され、風呂に入って洗い物を洗ってスーパーロボット大戦COMPACT2。

・バンカーとの決着。そりゃもうあっさりとな。6ターンまで間に合わないかなと思ったが、再動×3とGP-02クワトロの魂+アトミックバズーカーは強力無比。ガリモス大船長もギルもそりゃもうあっさりとな。

某お兄ちゃんの掲示板にて(覚え書きあり)

◆ 英にゃん氏が「D その景色の向こう側」をつまんないと一蹴していた。にょ先生ともども複雑な顔をするが、それ以前にどーも英にゃん氏は大きな勘違いをしているような気がしてならないのだが。

◆ 午前中は歯医者に行き、その足で研究室に…の前にGOLDでGGX。一人用で楽しんでいた所、乱入する一グループ。紗夢、梅萱、カイがそれぞれ3回ほど入ってくるが、うーん、なんというか、そこはファウストの得意間合いなんだよねぇ、一度転ばせたら二度と起き上がれないよーにしないと、ファウストに勝ちづらいと思うんだけどなぁ。面白いのは、みんな空中にぷかっと浮いた時にかなりファウストの立ちKに免疫がないこと、それ以上にしゃがみKを重ねられると途中から喰らい出すこと。結局10人目のじょにーに負けてしまうが、非常にスッキリ塩味な午前中。

◆ で、昼から研究室に行ったのだが、昨日の実験の続きといきたかったのだが、相方の方を優先させるとのことで、今日はお休み。んなもんでこちらはかねてより言われていた修論データを出すべく…。しかし元研究室の実験室が、修論と卒論で修羅場っていてとてもじゃないが4月まで使えねーよトカ言われてしまう。げびょびょーん。また元ボスに嫌味を言われそうだ、嫌味どころじゃないが。

◆ で、ようやっと覚え書きを書く。でもいい加減これは別コンテンツにした方がいいかな、このキーワードで飛んで来られても無駄なだけだし(笑)。

PCR

その前に:PCRで使うチップやチューブは必ず新しいものを使う。また、中にサンプルが入っているエッペンは、開ける前に必ず遠心機にかけて液を下に落とす事。

15-1.サンプルにつき、以下のモノを用意する。

・サンプル 任意量 <いつもは1μLくらいで良いかと
・dNTP(複写の材料)大体2.5mMOLくらいのやつ 5μL <サンプルの濃度により量は変化
・バッファー10倍希釈 5μL <固定
・DNAポリメラーゼ(Taq gene) 0.5μL <固定
・Primer (FandR) それぞれ1μL <サンプル濃度により濃度は変化
・滅菌水 <DNAサンプルと合わせて50μLになるようにする

(dNTP、ポリメラーゼ、バッファーは大抵は冷凍庫の中。ポリメラーゼなどは酵素なので、室温では反応が進行しやすい。

・dNTPというのは、要するにアデノシン三リン酸のこと。NにはA、T、G、Cが入る。
・DNAポリメラーゼってのはその名の通りDNAを合成する酵素。もちろん殆どの生物が持っているシロモノだが、PCRはサンプルを90度以上にするので、耐熱性の酵素が必要となる。もちろん市販されているPCR用のDNAポリメラーゼはすべて耐熱性。今回使ったTaq geneという酵素は、Thermus aquaticusから得られたもの。なんでも一番ポピュラーな酵素だとか。こいつを使った理由は、文献でプライマーと一セットになっていたから。
・プライマーについては省略。

15-2.うちの装備では0.5μLという単位でモノを取る事が難しいので(苦笑)、サンプルとその他を混ぜる前にサンプル数分作ってしまう。ちなみに、バッファーやプライマーETCの量は、

「サンプル数+ネガ(当日の方法で何も増えない事を確認するためのもの、水しか入れない)+α」

で行う。

 例えばサンプルが16あったとすれば、DNAサンプルを1μLとして

 dNTP 5×17=85μL
 buffer 5×17=85μL
 Primer 1&2 1×17=17μL(×2)
 Taq 0.5×17=8.5μL
 SDW 36.5×17=620.5μL

ということになる。なお、Taqは一番最後に混ぜること、なんにせよPCRにかける前は活性を抑えておきたいので、Taqおよびそいつを入れたチューブ(サンプル)は氷の中に突っ込んでおく事をオススメする。

16.PCR機にかけてすいっちおんっとな。ちなみに今回のプライマーはGCクランプのついたモノで、94度(二本鎖解離温度)で45秒、38度(アニーリング時期)で45秒、72度(DNA伸張)で1分というサイクルを30回行った。



◆ で、この後でPCR増幅産物を用いてDGGEに移るわけだが。

DGGEについては以前に書いたとおりなんだが、例えばゲル板の変性剤濃度勾配は、アタマからケツまで何パーセントにするのか等は経験と文献から持ってくる話になる。今回は別の人の実験と併せて、という形になるので、これが固定された方法、ではないのよ。それに多く失敗してるし(笑)。

1.泳動用のゲルを作る。使用したのはアクリルアミドゲル。知っている人は知っているが、液体及び固体の状態では、神経を侵す猛毒である。皮膚に触れても不味いので、使用の際は手袋をする事。

・37.5:1 30%アクリルアミド
  アクリルアミド 泳動用 29.2g
  N-N'メチレンビス(アクリルアミド) 0.8g

 100mLのDWに溶かす。吸熱反応で溶けにくいので、スターラーを使うこと。アクリルアミドは冷蔵庫にて保存。ちなみにこっちで作るゲル板がメイン。

・20%C・32.5%アクリルアミド
  アクリルアミド 泳動用 25.287g 
  N-N'メチレンビス(アクリルアミド) 6.23g

 100mLのDWに溶かす。吸熱反応で更に溶けにくいので、スターラーを使うこと。こっちのゲルは、バンドをシャープに出すための「おまけ」。但し色々な意味であったほうが絶対に良い。

2.100mM Tris pH6.8を、HCLの滴下で調整して作る。ちなみに今回は0%変性ゲルと80%変性ゲルを使う(自分の見たいDNAバンドが見やすい濃度勾配範囲を使うべし)。

・0% Denature
  30% アクリルアミドストック  7mL
  10×TBEバッファー 3.5mL
  DW 24.5mL
      計 35mL

・80% Denature
  30% アクリルアミドストック  7mL
  10×TBEバッファー 3.5mL
  尿素(Urea) 11.9g
  Formamide 11.2mL
  DW 適量
      計 35mL

・10% APS 過硫酸アンモニウム 40mg/400μL

 Forimamideは冷蔵庫内にて保存する。尿素はこれも吸熱反応をおこし、水に溶けにくい。ピペットマンあたりを使ってよく混ぜて溶かす事。

 0%溶液の組成は簡単だが、80%溶液の尿素及びForimamideの量は系数的に計算されているらしい。この計算方法については詳細不明で、こっちは文献を参照してやっている。よって40%ゲル溶液は尿素5.95g、Forimamide5.6mLにすればいいわけではない、らしい。

3.ゲルを流し込むべく泳動プレート、及びゲルを送るポンプ、グラジェントメーカーをセット。予めグラジェントメーカーのゴム管の通り道が閉まっている事を確認。また、一度コム(櫛)を刺して、泳動ゲルをどこまで流すのかチェックしておく事。

4.各ゲル溶液をデシケーターに入れて脱気。

・ちなみに本来アクリルアミドは酸素存在条件下では重合を起こさず、ゲルにならないため、吸引機にて完全に脱気する事が望ましい。但し今回はサイフォンを使い、時間をかけて濃度勾配のあるゲル板を作るので、途中で流している最中にゲルになっちまうという可能性がある(実際、なった)。よってこの二つのゲル溶液はデシケーターにて20分ほど脱気する程度に止める。

・ちなみに、空気に触れるゲル板上部になる、0%ゲル溶液のみを強く脱気、という手法は0%溶液だけが先にゲル化してしまい、滅茶苦茶なゲル板ができる可能性があるため、却下(実際、なった)。

5.グラジェントメーカーの二つのチャンバー(シリンダー形の容器。二つ並んでいて底がゴム管でつながっており、そこから更に外へゴム管が繋がっている。これを流すことにより、サイフォンの原理で濃度勾配のあるゲルができるわけ)のうち、奥のチャンバーに濃いゲル溶液(80%)を入れる。空気を入れないようにグラジェントメーカーは傾け、静かに流し入れる事。

6.80%の溶液を入れたら、二つのチャンバーの間を塞いでいるネジ?を静かに開け、ゴム管の間をゲルで満たす。気泡があるとまずいわけである。

7.他方のチャンバーに0%溶液を入れ、双方にスターラーを入れておく。

8.ポンプのスイッチを入れ、双方のチャンバーに先程作ったAPSを190μL、TEMED16μLを素早く入れ、ゴム管を開けてゲルをプレートのほうへ流す。

・APS、TEMEDはどちらもアクリルアミドゲルを固化させるための鍵。濃度によりそのできるゲルの強さや、ゲル化への容易さは異なる。

・上手く流れていれば、泳動プレート内はアクリルアミドで下から満たされていく。

9.ゲルがコムに触れるか触れないかという所までせり上がってきたらポンプを止め、途中のゴム管をクリップで塞ぐ。

10.ゲルの上部(コムは外しておく)に蒸留水を静かに流しておく(ゲルと酸素が混ざるのを防ぐため)。30〜1時間待つ。

11.上部の水をプレートを傾けて捨てる(逆さまにしておいて構わないが、下にキムタオル等をしいておくこと)。これを重層と呼ぶ。

12.上部に流す濃縮ゲルを作る。ちなみに濃縮とあるが、別にゲルの濃度が濃いわけではなく、DNAをここで集めて濃縮させる役割をもつから濃縮ゲルなのである。

 C20-32.5アクリルアミドストック 1.5mL
 1M Tris-HCl 0.75mL
 DW 15mL

13.水を切った泳動プレートに、12で作ったゲル溶液を流す。

・ゲル溶液にTEMEDを 8μL、APS10%を120μL(←先程のゲルより多い)入れ、手早く泳動プレート上部からまんべんなくゲルをピペットマンにて流し込む。大体4mLくらいかと。刺したら2時間くらい待つ

・間髪いれずゲルにコムを差し込む。

・当たり前の話だけど、アクリルアミドを扱う時は必ず手袋をし、その手袋をしたままどこでも触らない事。

14.この待ち時間を利用して、まず泳動用のTBEバッファーを10倍希釈したものを3L弱作り、電子レンジで70度弱まで温める。ついで熱湯を作り、泳動機に循環させておく。

・ちなみに今実験で使っているTBEバッファーの組成は以下のとおり(1Lあたり)。
  Tris 121.14g
  BoricAcid(ホウ酸) 51.32g
  EDTA 3NA(2NAではない) 3.72g
    DWに溶かし、1000mLにする。

15.濃縮ゲルが白くなっている事を確認し、コムを垂直に静かに引き抜く。

16.予め一定量バッファーを入れた泳動層内に泳動プレートを、内側にUの字型のプレートが来るように差し込み、固定する。後にプレートに挟まれた泳動層内を、側面の穴から漏れる程度にバッファーを入れて満たす。次いで泳動層外側をもバッファーで満たすが、この時プレートで囲まれたバッファーと外側のバッファーが混ざらないようにすること(流し込む際は混じっても構わないが、外側のバッファーは少なめにせよという意味)こうしないと電極がゲルに対して垂直になってくれない。

17.サンプル2〜3μL、ローディングバッファー1μ以下を混ぜて、サンプルを流す。この時ラダーも一緒に流せばよい(後はほぼ電気泳動と同じである)。ちなみに電圧は200V、泳動時間は1.5〜3.5時間くらい。


◆ 余談だが、「重層」という言葉の漢字がわからず、「ソウ」ってどう書くんですかと聞いたところ、「成層圏のソウ」「高層ビルのソウ」「Layerのソウ」と言う答えが返ってきた。それで返した私「活断層のソウですね」「そー」。いや、別にシャレがオチなわけじゃなくて、「×××ってどう書くんですか?」と聞かれた時、その返し方で多少なりともその人の性格と教養(と人生)がわかるんだなーと思って。

A:「尊敬のソンってどう書くの?」
B:「尊属殺人のソンよ」

 …ちなみにこれは「サディスティック・19」より(笑)。

◆ 上の覚え書きを書き終えて、晩飯がてらGIGAへ行き、軽くノされて横の本屋に寄り、虚淵先生のインタビューがあったので電撃姫を買う。

は!?

・……や、詳しくは申しませんが、とりあえず普通に読めば目につくから絶対今月の電撃姫には目を通すように、△×△×番長、仮面参謀氏、中将、それと今木さんも。

・とりあえず有り体に話せば、「ニトロプラスの次回作が、大変な事に!!」 というわけで。

◆ SRWCOMPACT2。

・ギャンドラーとの戦闘は終わり。なんというか、ただ無駄に時間のかかる面だった!

・ムゲとの戦闘も終わり。3ターン目でアインストレジセイアを出現させ、脱力を3回ほどかけ、アルトアイゼン+ダンガイオーでさくっと倒し、3ターン敵フェイズにムゲが登場、サクッと断空砲で倒して4ターンでおしまい。ちなみに画面右側はブルージェット一人でカタがつく所が凄い。熱血系を持っていないのが痛いが、NT-1アレックスと並ぶ切込み役としては充分過ぎますがな。

・で、今は最終決戦。なんでここまで来て9体しかユニットを出せないかなぁ(笑)。

・今になって思ったのだが、宇宙と地上に分かれて展開する時、アイナはともかくシローを宇宙に止まらせたのは誰の采配ですか? せめてEz-8を地上側に送って、代りにリ・ガズィあたりを送るとか考えてくれよ…オーラバトラーがいるから地上に戻ったというのに、アムロ大尉はリ・ガズィに乗って降りちゃうし…

・

ん、…寝た

◆ 久しぶりの昼寝(昼寝というのは、昼まで寝ているから昼寝というのだ)。

◆ 前日のボヤキにT中からアドレスを教えてもらう。ここ。「百舌鳥の贄」のプレイ日記が、なかなか大変な事になっているみたい、よっしゃよっしゃ。あ、リンクは貼っても大丈夫かな?

◆ で、ルネテラスへ行くと案の定△×△×番長が悶絶していた。まぁそらそーだわ、Nitro+が「コレクター・ユイ」みたいな絵のゲーム作るとなればなぁ(笑)。

◆ で、SRWはラストスパート。

・30面、アインスト系との最終決戦。これもまた時間のかかる面だなぁ。ちなみにメンツはエクセレンとキョウスケを除き、真・ゲッター、アムロ+NT-1アレックス、コン・バトラーV(殆ど補給+脱力係だった)、ダンクーガ、修理兼再動役のマリア+ビューナスA、援護兼再動役のアイザム、それにブルージェットといった所。11ターンでクリアしたが、多分もっと短縮できる。ちなみにここまでで合計634ターン。

・ラスト、メビウスのなんちゃら。ヤクト・ドーガ部隊はどっちもカミーユのアトミックバズーカーで半壊させ、残りをぷちぷちっとな。それにしても増援は嬉しいが、ロムはいいからブルージェットを持ってこんかい! 結局サザビー(HP600000)は真・ゲッターとダンガイオーにより瞬殺。サザビーは射程1の武器が格闘武器しかないもんで、鉄壁でダメージが10になった(笑)。

・結局離脱したりでロムがあまり使わず、代りに武器が全てP兵器になったブルージェットがもう使えすぎ。エネルギー効率も極めて良くて。

・飛影チームは、ジョウが飛影に乗ってしまった段階でお払い箱。合体が強かったというのに…全5段階改造済みでも遅いっちゅーの。

・スーパーロボットは、何故かダンクーガはあまり使わず、コン・バトラーは金稼ぎと脱力、ラスト近くでトドメ要員、でもってスーパーロボットのメインはなんだかんだ言ってダンガイオーだった。奇跡もさることながら、うちのメンツは多分努力以外はほぼ全て覚えてるんじゃないかってくらいの充実ぶり。サイキック斬+魂が4回も使えてしまう。真・ゲッターもかなり強かったが、誰も「ひらめき」を覚えてくれなかったのがイタかった。一人乗りスーパーロボットは、甲児が中盤までかろうじて使えた程度。鉄壁をかけてもダメージがきついんじゃ、複数乗りじゃないと無理。ちなみにダイターン3は集中しか覚えなかったので論外。

・モビルスーツはなんだカンダでNT-1アレックスが主役。それに攻撃の当たらないvガンダム、それに一発屋GP-02。でもパイロットが不足して困った。カミーユもアムロも加速を覚えず、シーブックは加速は覚えても熱血も魂も覚えてくれなかったんですもの…なんで一番使いやすかったクワトロが……!

・サポートはとりあえずトリプルジムがメインなのだが、部隊にいない事の方が多くてあんまり使わなかった覚えが。代わりは祝福に加えて再動も覚えるマリア。あとはシーラやロミナ姫だけで充分。あとは援護役のシャザーラ(アイザム)。再動×2がかなり強力。

・感想は後日、ではRatty、次はアナタの番だよ〜